A reação começa com a nitração do ácido ftálico, em presença de ácido sulfúrico concentrado, para a obtenção do derivado 3- nitroftálico. Em seguida, o ácido nitroftálico foi convertido a 3- nitroftalimida, através da adição de hidrazina com aquecimento e refluxo. Após essa série de reações, obteve-se, finalmente, o luminol através da redução do grupo nitro da nitroftalidrazida empregando ditionito de sódio como agente redutor.

Os criminalistas misturam o pó de luminol com um líquido contendo peróxido de hidrogênio (H₂O₂), um hidróxido (OH-) e outros produtos químicos e despejam o liquido em um borrifador.

O peróxido de hidrogênio sofre uma reação de oxirredução com o meio alcalino. Por conseguinte, o H2O2 é reduzido e a hidroxila do meio alcalino, oxida, formando o ânion hidroperoxila. Nesta etapa, a diazoquinona sofre oxidação na presença do ânion hidroperoxila, formando o endo-peróxido. A decomposição desse composto produzirá o 3-amino-ftalato, o qual é responsável pela emissão da quimiluminescência. Se o 3- amino-ftalato for produzido em seu estado excitado, este causará a quimiluminescência. Entretanto, se formado em seu estado fundamental, não ocorrerá a emissão desta energia.

O peróxido de hidrogênio e o luminol são os principais agentes da reação química, mas para que produzam um brilho forte, precisam de um catalisador para acelerar o processo. A mistura detecta a presença desse catalisador, no caso o ferro contido na hemoglobina.

A preparação da solução reveladora deve ser feita próxima ao momento do uso e requerer um ambiente escuro para boa visualização da luz azulada gerada.

Referências: FERREIRA, A. J.; SOUZA, S. B. Funcionamento do Luminol e sua Utilização para a Identificação de Sangue Latente. Revista Científica da FHO: UNIARAS, v. 6, n. 1, p. 37-48, 2018. Disponível em: http://www.uniararas.br/revistacientifica/anteriores-6-1.php

LUME UFRGS. Síntese e caracterização do luminol e derivados de alguns de seus precursores. Estudo de sua aplicação na visualização de manchas latentes de sangue. Disponível em: https://lume.ufrgs.br/handle/10183/137702. Acesso em: 20 nov. 2019.